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非包膜病毒如何清除支原體污染?

更新時間:2024-03-23  |  點擊率:822

細胞培養物被支原體污染是經常發生的。出于科學、安全和經濟的原因,在基礎研究、診斷和生物技術生產中,必須從受污染的細胞培養物中消除支原體。在細胞培養物中消除、滅活或抑制支原體常用的方法是用抗生素治療。然而,一般來說,抗生素治療不能持久、成功地消除污染的支原體。此外,抗生素的細胞毒性可能對真核細胞造成不良的副作用,并可能促進耐藥支原體菌株的發展。Mynox®是第一種生物試劑,通過誘導微生物死亡來消除支原體污染。它已經被證明是有效的,只有一個治療。Mynox®的活性基于其生物物理特性,這使得耐藥菌株的不易產生。

 

如何處理非薄膜病毒中污染的支原體?德國MB公司生產的Mynox細胞支原體清除,不僅能清除細胞中的支原體,對于非包膜病毒也有效。

 

冷凍或新鮮等量的細胞和無細胞碎片的病毒懸浮液可以處理。病毒滴度不影響治療的成功。

3.1細胞制備及消泡液

1.使用1.5 ml帶安全鎖的無菌反應管配制消毒液。

2.加入1 ml不加FCS的細胞培養基。

3.加入100µl Mynox®

4. 將含有高達8% (v/v) FCS125µl病毒原液轉移到混合物中。漩渦。包括病毒原液的處理混合物的總體積為1.225 ml

注意:在旋轉過程中,請確保消除液濕潤離心機管的整個內表面。

3.2 Mynox®的處理和去除

1.在室溫下將消去液孵育2小時。

2.將處理混合物在培養基中稀釋1:10,停止反應。這可以通過使用消除混合物感染亞融合宿主細胞培養物以同時繁殖無支原體病毒培養物來實現。最終體積應為消泡液體積的10倍。

注意:感染前檢測宿主細胞系是否受支原體污染。


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