與傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)不同，三維（3D）細(xì)胞培養(yǎng)，可以更好地重現(xiàn)細(xì)胞在體內(nèi)的狀態(tài)。該方法正逐漸成為細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大熱門。

3D培養(yǎng)種類眾多，從原理上可以大致分為以下三類：

一、3D水凝膠培養(yǎng)

交聯(lián)的多聚鏈，或復(fù)雜的天然或合成蛋白分子組成的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成的水凝膠，具有與天然組織相似的生物物理學(xué)特性，因此，可以作為3D細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。該材料可以單獨(dú)作為基質(zhì)使用，也可以與其他材料聯(lián)合使用。常見(jiàn)的3D水凝膠培養(yǎng)材料有有ECM凝膠、胞外基質(zhì)等。

該方法優(yōu)勢(shì)在于以下幾點(diǎn)：

1.應(yīng)用歷程久，支持文獻(xiàn)較多；

2.提供天然生物配體；

3.通常含有生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子。

二、細(xì)胞聚集

細(xì)胞聚集是指幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起形成菌團(tuán)的現(xiàn)象。懸滴培養(yǎng)板與低粘附平面等材料都能使細(xì)胞有很好的聚集效果。

該方法的優(yōu)勢(shì)在于以下幾點(diǎn)：

1.有各種各樣的相關(guān)器材可供挑選

2.細(xì)胞成球的大小相對(duì)更好控制

三、培養(yǎng)支架

培養(yǎng)支架是一種提供物理支撐的培養(yǎng)手段，細(xì)胞可以進(jìn)入支架間隙生長(zhǎng)并行使功能。培養(yǎng)支架大致可分為兩大類：

• 天然支架（如膠原、明膠、纖維蛋白、幾丁聚糖等），生物兼容性，但穩(wěn)定性較差。

• 合成支架（如聚苯乙烯、聚己內(nèi)酯、聚氨酯等），具有一致性、穩(wěn)定性比較好，生物兼容性較差。

該方式的優(yōu)勢(shì)在于以下幾點(diǎn)：

1.一致性或生物兼容性都能夠照顧到；

2.與現(xiàn)有的生物培養(yǎng)器皿以及下游分析方法都有比較好的兼容。

無(wú)論是普通的細(xì)胞培養(yǎng)還是3D培養(yǎng)，都需要合適的細(xì)胞培養(yǎng)體系，來(lái)給細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)環(huán)境。胎牛血清作為一種重要的添加成分，其品質(zhì)的優(yōu)劣，在一定程度上決定了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否理想。

Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清，采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段，血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子，非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)，一旦胚胎發(fā)育好后這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎，已接近足月，不能作為胎牛血清的原料來(lái)使用。

出廠前均應(yīng)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)控，并附詳細(xì)《檢測(cè)報(bào)告》，如pH值、滲透壓、內(nèi)毒素、病毒檢測(cè)、促細(xì)胞生長(zhǎng)能力、無(wú)菌等檢查。其中，由于內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果影響較大，且不同批次的血清，內(nèi)毒素差異又不易控制。

Ausbian血清從出廠，到實(shí)驗(yàn)室，全程低溫冷鏈保護(hù)，盡可能避免血清反復(fù)凍融。